Identification de la contamination par mycoplasmes via des réactifs qPCR hautement rapides et efficaces

La contamination des cultures cellulaires par des mycoplasmes est un problème majeur au sein des laboratoires. Ces petites bactéries, invisibles au microscope optique, altèrent considérablement les cellules, entrainant de graves conséquences au niveau du métabolisme cellulaire (mort cellulaire, croissance cellulaire altérée, absence de transfection, modifications morphologiques et phénotypiques, profils d’expression génique altérés,…) et de ce fait, sur la fiabilité des données obtenues en utilisant des cultures contaminées. Il a récemment été rapporté qu’approximativement 15-35% des lignées cellulaires permanentes étaient contaminées par des mycoplasmes [1].

Afin d’identifier une potentielle contamination par mycoplasmes dans vos cultures cellulaires, AnyGenes a développé la gamme de réactifs MycoDiag. Ce kit permet une détection rapide et efficace d’ADN spécifiques de mycoplasmes, directement à partir de surnageants de culture cellulaire. Cette analyse est basée sur la PCR quantitative en temps réel (qPCR) ou PCR en point final selon votre plateforme.

Les réactifs MycoDiag assurent un criblage rapide et fiable de vos surnageants de culture cellulaire par qPCR ou PCR, afin de détecter toute contamination par Mycoplasmes.

Basée sur des lots de primers spécifiques désignés via des critères très stringents et validés expérimentalement par un processus strict de contrôle qualité, la performance des réactifs MycoDiag d’AnyGenes a été soigneusement optimisée pour fournir une très haute sensibilité et spécificité. Le kit MycoDiag permet la détection des 25 espèces de mycoplasmes les plus représentatives, retrouvées dans les cultures cellulaires contaminées [2] (voir liste ci-dessous).

M. agalactiae,

M. genitalium,

M. pulmonis,

M. arginini,

M. hominis,

M. salivarium,

M. arthritidis,

M. hyorhinis,

M. spermatophilum,

M. bovis,

M. hyosynoviae,

M. synoviae,

M. cloacale,

M. opalescens,

M. timone,

M. falconis,

M. orale,

A. laidlawii,

M. faucium,

M. pirum,

Spiroplasma,

M. fermentans,

M. pneumoniae M129,

U. urealyticum.

M. gallisepticum,

Les kits MycoDiag assurent un criblage rapide et robuste de vos surnageants de culture cellulaire en moins de 2 heures avec votre automate qPCR appuyé par des contrôles qualité fiables et efficaces (Contrôle Négatif, Contrôle Positif à l’aide d’un ADN de mycoplasme, et un Contrôle Interne afin de valider l’absence d’inhibiteurs de PCR dans vos échantillons), ce qui évite l’obtention de résultats faux négatifs.

Grâce à des lots de primers hautement sensibles et spécifiques, le kit MycoDiag permet la détection d’ADN de Mycoplasmes dans vos échantillons par qPCR / PCR.

L’électrophorèse sur gel d’agarose, après PCR avec le kit MycoDiag, permet d’observer des bandes entre 121 et 230 pb, en cas de contamination par Mycoplasmes des surnageants de culture cellulaire. — Légende : MT :Marqueur de taille ; Echantillons 1, 2 and 3 : résultats négatifs ; Echantillon 4 : Résultat positif, donc présence d’une contamination par des mycoplasmes dans ce surnageant de culture cellulaire; POS CTR : Contrôle Positif avec bandes localisées à 129-142 et 230 pb, NEG CTR : Contrôle Négatif, absence d’amplification

Le kit MycoDiag est désormais utilisé comme outil de choix dans bon nombre de laboratoires de recherche, du secteur publique et privé, afin de faciliter les contrôles de routine des cultures cellulaires.

Les avantages du kit MycoDiag

: Compatibles avec tous les appareils qPCR / PCR, les réactifs MycoDiag, prêts à l’emploi, hautement sensibles et spécifiques, permettent la détection de contamination par Mycoplasmes de vos cultures cellulaires, en moins de 2 heures.

Prix des réactifs MycoDiag

Référence Catalogue	Nombre de Réactions	Prix (HT)
MycoDiag-X20	20	*
MycoDiag-X50	50	*
MycoDiag-X100	100	*

* X : réactifs de type W, R, LR, F, selon l’instrument de qPCR ou P pour PCR en point final (cf. Fichier de compatibilité)

Pour plus d'information téléchargez le protocole des réactifs MycoDiag . cliquez ici .

** Pour plus d'informations concernant nos prix, veuillez nous contacter à [email protected]

*** prix sont valables uniquement en FRANCE, merci de contacter le distributeur local de votre pays

(1) Tantibhedhyangkul W et al. Anti-Mycoplasma Activity of Daptomycin and Its Use for Mycoplasma Elimination in Cell Cultures of Rickettsiae. Antibiotics (Basel). (2019); 8(3): 123

(2) McGarrity G. et al. Mycoplasmas and tissue culture cells. (1992). In: Maniloff, J., McElhaney, R.N., Finch, L.R., Baseman, J.B. (Eds.), Mycoplasmas, Molecular Biology and Pathogenesis, American Society for Microbiology, 445-54