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Grâce à sa précision, sa sensibilité et sa flexibilité, la technologie qPCR est largement utilisée et particulièrement efficace pour explorer le paysage de l’expression génique, y compris dans le cadre d’expériences sur cellule unique.
Pour garantir des résultats robustes et fiables en analyse de cellule unique par PCR en temps réel (qPCR), plusieurs étapes clés doivent être rigoureusement maîtrisées : conception expérimentale, préparation de l’échantillon et isolement de la cellule unique, lyse directe, transcription inverse, préamplification, qPCR et analyse des données.
Chaque étape doit être soigneusement optimisée afin d’assurer des résultats suffisants, reproductibles et de haute qualité.
La lyse directe constitue une solution rapide pour obtenir des lysats cellulaires à partir de cultures ou de tris cellulaires, tout en évitant les pertes d’ARN associées aux protocoles classiques d’extraction. Bien que cette approche offre un protocole simple et rapide, la formulation du tampon de lyse reste déterminante pour préserver les performances de la qPCR, protéger l’ARN contre la dégradation et éviter son adhérence aux surfaces plastiques (tubes ou plaques).
La préamplification est une étape complémentaire et cruciale permettant un enrichissement spécifique des séquences d’ADNc ciblées, en particulier pour les gènes faiblement exprimés ou en cas de quantité limitée de matériel biologique.
AnyGenes® a développé ses propres gammes de kits de lyse directe (DiLysis) et de préamplification (SpeAmpn) afin de vous proposer une solution complète et optimisée pour vos analyses de profils d’expression en cellule unique.
Ces kits ont été rigoureusement optimisés avec notre système SignArrays® pour permettre l’étude des voies de signalisation à partir de quelques cellules seulement ou de quantités infimes d’ARN (à l’échelle du nanogramme).
Découvrez dès maintenant nos réactifs DiLysis et SpeAmpn pour réussir vos analyses en cellule unique, entièrement compatibles avec l’étude des voies de signalisation via notre système SignArrays®.
Proposés à des prix très compétitifs, nos conditionnements à partir de 10 réactions permettent de tester facilement vos premières expériences en cellule unique ou d’optimiser vos résultats qPCR à partir de faibles quantités d’ARN.
Vous avez des échantillons précieux ou rares à analyser ? Utilisez notre nouvelle gamme de réactifs SpeAmpn pour analyser jusqu’à 4 voies de signalisation avec seulement 5 à 50 ng d’ARN.
Réaliser des analyses de voies de signalisation avec uniquement 10 à 100 cellules ? C’est désormais possible avec nos réactifs de lyse directe DiLysis.