IDENTIFICATION DE LA CONTAMINATION PAR MYCOPLASMES VIA DES RÉACTIFS QPCR HAUTEMENT RAPIDES ET EFFICACES
La contamination des cultures cellulaires par des mycoplasmes est un problème majeur au sein des laboratoires. Ces petites bactéries, invisibles au microscope optique, altèrent considérablement les cellules, entrainant de graves conséquences au niveau du métabolisme cellulaire (mort cellulaire, croissance cellulaire altérée, absence de transfection, modifications morphologiques et phénotypiques, profils d’expression génique altérés,…) et de ce fait, sur la fiabilité des données obtenues en utilisant des cultures contaminées. Il a récemment été rapporté qu’approximativement 15-35% des lignées cellulaires permanentes étaient contaminées par des mycoplasmes [1].
Afin d’identifier une potentielle contamination par mycoplasmes dans vos cultures cellulaires, AnyGenes a développé la gamme de réactifs MycoDiag. Ce kit permet une détection rapide et efficace d’ADN spécifiques de mycoplasmes, directement à partir de surnageants de culture cellulaire. Cette analyse est basée sur la PCR quantitative en temps réel (qPCR) ou PCR en point final selon votre plateforme.
Basée sur des lots de primers spécifiques désignés via des critères très stringents et validés expérimentalement par un processus strict de contrôle qualité, la performance des réactifs MycoDiag d’AnyGenes a été soigneusement optimisée pour fournir une très haute sensibilité et spécificité. Le kit MycoDiag permet la détection des 25 espèces de mycoplasmes les plus représentatives, retrouvées dans les cultures cellulaires contaminées [2] (voir liste ci-dessous).
Les kits MycoDiag assurent un criblage rapide et robuste de vos surnageants de culture cellulaire en moins de 2 heures avec votre automate qPCR appuyé par des contrôles qualité fiables et efficaces (Contrôle Négatif, Contrôle Positif à l’aide d’un ADN de mycoplasme, et un Contrôle Interne afin de valider l’absence d’inhibiteurs de PCR dans vos échantillons), ce qui évite l’obtention de résultats faux négatifs.
Le kit MycoDiag est désormais utilisé comme outil de choix dans bon nombre de laboratoires de recherche, du secteur publique et privé, afin de faciliter les contrôles de routine des cultures cellulaires.
THE ADVANTAGES OF MYCOPLASMA DETECTION ASSAY (MycoDiag)
Tantibhedhyangkul W et al. Anti-Mycoplasma Activity of Daptomycin and Its Use for Mycoplasma Elimination in Cell Cultures of Rickettsiae. Antibiotics (Basel). (2019); 8(3): 123.
Mycoplasmas and tissue culture cells. (1992). In: Maniloff, J., McElhaney, R.N., Finch, L.R., Baseman, J.B. (Eds.), Mycoplasmas, Molecular Biology and Pathogenesis, American Society for Microbiology, 445-54.